Kapel Sistina (bahasa Latin: Sacellum Sixtinum, bahasa Italia: Cappella Sistina) adalah salah satu kapel di lingkungan Istana Apostolik, kediaman resmi Sri Paus di Kota Vatikan. Nama kapel ini diambil dari nama Paus Sistus IV, yakni paus yang memugarnya dari tahun 1473 sampai tahun 1481. Sesudah dipugar, kapel ini dijadikan tempat pelaksanaan kegiatan keagamaan maupun kenegaraan lembaga kepausan. Kapel Sistina kini dimanfaatkan sebagai tempat pelaksanaan konklaf, yakni proses pemilihan paus baru. Kapel ini terkenal karena fresko-freskonya, teristimewa fresko pada langit-langit dan fresko Penghakiman Terakhir karya Michelangelo.

Pada masa jabatan Paus Sistus IV, satu tim pelukis Renaisans beranggotakan Sandro Botticelli, Pietro Perugino, Pinturicchio, Domenico Ghirlandaio, dan Cosimo Rosselli membuat rangkaian fresko Riwayat Musa dan Riwayat Kristus, potret-potret para paus di atas rangkaian fresko riwayat, serta trompe l'oeil tirai berjuntai di bawah rangkaian fresko riwayat. Pengerjaan lukisan-lukisan tersebut rampung pada tahun 1482, dan Paus Sistus IV merayakan misa pertama di Kapel Sistina pada tanggal 15 August 1483, hari raya Santa Maria diangkat ke surga. Dalam kesempatan yang sama, Kapel Sistina diberkati dan didedikasikan kepada Santa Perawan Maria.

Dari tahun 1508 sampai tahun 1512, Michelangelo melukisi langit-langit Kapel Sistina atas pesanan Paus Yulius II. Lukisan pada langit-langit Kapel Sistina telah mengubah jalan sejarah seni rupa Dunia Barat, dan dikagumi sebagai salah satu adikarya peradaban umat manusia. Michelangelo kembali ke Roma sesudah kota itu diserbu dan dijarah tentara Kekaisaran Romawi Suci pada tahun 1527, dan mengerjakan lukisan Penghakiman Terakhir dari tahun 1535 sampai tahun 1541 atas pesanan Paus Klemens VII dan Paus Paulus III. Kemasyhuran lukisan-lukisan Michelangelo telah memikat jutaan pengunjung ke Kapel Sistina selama lima ratus tahun terakhir.